La hematología del laboratorio clínico se construye sobre tres gestos: contar, medir y mirar. El contador hematológico automatizado entrega recuentos y parámetros derivados; el frotis de sangre periférica teñido con Wright o Wright-Giemsa permite confirmar, matizar o desmentir lo que la máquina informó. El tecnólogo médico decide cuándo un resultado exige revisión morfológica, cuándo un valor es analíticamente imposible y cuándo hay que repetir la muestra antes de informar.
Los tres índices clásicos se derivan de hemoglobina, hematocrito y recuento de eritrocitos. El volumen corpuscular medio se obtiene multiplicando el hematocrito en por ciento por diez y dividiendo entre el recuento de eritrocitos expresado en millones por microlitro. La hemoglobina corpuscular media multiplica la hemoglobina en gramos por decilitro por diez y divide entre el mismo recuento. La concentración de hemoglobina corpuscular media multiplica la hemoglobina por cien y divide entre el hematocrito. La regla de las tres veces —hemoglobina aproximadamente el triple del recuento eritrocitario, hematocrito aproximadamente el triple de la hemoglobina— sirve como control interno rápido de plausibilidad; cuando falla, hay que sospechar lipemia, crioaglutininas, hemólisis in vitro o un coágulo en el tubo antes que una enfermedad.
Un recuento leucocitario falsamente alto aparece cuando circulan eritroblastos, porque el contador los cuenta como leucocitos; la corrección se hace con el número de eritroblastos por cien leucocitos observados en el frotis. Las plaquetas gigantes pueden contarse como eritrocitos, y los agregados plaquetarios inducidos por EDTA producen seudotrombocitopenia: el frotis muestra los cúmulos y la repetición en citrato resuelve la duda. La lipemia y la hiperbilirrubinemia elevan la hemoglobina medida por espectrofotometría; la hemólisis in vitro baja el recuento eritrocitario mientras la hemoglobina permanece, con una concentración de hemoglobina corpuscular media imposiblemente alta como pista.
El tubo con citrato de sodio exige una relación fija entre anticoagulante y sangre: un tubo insuficientemente lleno diluye el plasma y prolonga los tiempos; un hematocrito muy elevado reduce el volumen de plasma y produce el mismo artefacto, por lo que el volumen de citrato debe ajustarse. El tiempo de protrombina explora la vía extrínseca y común y se estandariza mediante el INR, que eleva la razón entre el tiempo del paciente y la media de los normales a la potencia del índice de sensibilidad internacional del reactivo. El tiempo de tromboplastina parcial activado explora la vía intrínseca y común. La distinción entre déficit de factor y presencia de inhibidor se hace con la mezcla uno a uno con plasma normal: corrige el déficit, no corrige el inhibidor. La muestra de coagulación es la más frágil del laboratorio: orden de extracción, llenado completo, mezcla por inversión y tiempo hasta la centrifugación deciden el resultado.
Fuentes de referencia: consensos del ICSH sobre nomenclatura y recuentos hematológicos, documentos de consenso CLSI sobre recolección y sobre pruebas de coagulación, y los requisitos de control de calidad de CLIA. Los intervalos de referencia dependen del método, del analizador y de la población: este material trabaja con principios y da en el enunciado cualquier valor necesario para razonar.
1. ¿Cuál es el mecanismo por el que el EDTA conserva la muestra para el hemograma?
El EDTA es un agente quelante que secuestra el calcio ionizado, cofactor indispensable de varios pasos de la cascada. No actúa sobre la antitrombina (mecanismo de la heparina), no precipita fibrinógeno ni inhibe enzimas plaquetarias. Fuente: documentos de consenso CLSI sobre tubos de recolección y aditivos.
2. Un tubo con EDTA llega llenado solo hasta un tercio de su volumen nominal. ¿Qué efecto tiene sobre el hemograma?
El exceso relativo de EDTA aumenta la osmolalidad del medio, los eritrocitos pierden agua y se encogen: el hematocrito medido y el volumen corpuscular medio bajan de forma artefactual. La hemoglobina, que se mide sobre el lisado, no cambia, de modo que la concentración de hemoglobina corpuscular media sube. Fuente: consenso CLSI sobre llenado de tubos y consensos del ICSH.
3. ¿Por qué el tubo de citrato para pruebas de coagulación debe llenarse hasta la marca?
El citrato actúa por quelación reversible y el ensayo se realiza recalcificando el plasma; si sobra citrato respecto a la sangre, la recalcificación es insuficiente y los tiempos se alargan de forma artefactual. Fuente: documentos de consenso CLSI sobre recolección para pruebas de coagulación.
4. Un paciente con hematocrito de 68 % tiene tiempos de coagulación prolongados de forma inexplicable y sin clínica hemorrágica. ¿Cuál es la explicación más probable?
Con hematocrito muy alto la fracción plasmática del tubo se reduce; como el citrato se dosificó para un hematocrito habitual, sobra anticoagulante en relación con ese plasma y los tiempos se prolongan. La solución es ajustar el volumen de citrato con la fórmula establecida. Fuente: consenso CLSI sobre muestras de coagulación con hematocrito extremo.
5. ¿Cuál es el propósito del orden de extracción de los tubos en la venopunción?
El arrastre de aditivos entre tubos es una fuente clásica de error preanalítico: el EDTA que pasa a un tubo de química eleva el potasio y desploma el calcio. El orden establecido minimiza ese arrastre. Fuente: documentos de consenso CLSI sobre venopunción y orden de tubos.
6. Un tubo de química recibido tras un tubo de EDTA muestra potasio muy elevado y calcio muy bajo en un paciente asintomático. ¿Cuál es la conducta correcta?
La combinación de potasio muy alto con calcio muy bajo es la firma analítica del arrastre de EDTA, porque la sal potásica aporta potasio y el quelante secuestra el calcio. Repetir en el mismo tubo reproduce el error. Fuente: consenso CLSI sobre errores preanalíticos por arrastre de aditivos.
7. ¿Qué diferencia fundamental existe entre suero y plasma como matriz analítica?
El suero es el líquido que queda tras la coagulación completa, por lo que ha perdido fibrinógeno y los factores consumidos; el plasma se obtiene de sangre anticoagulada y los conserva. Fuente: documentos de consenso CLSI sobre matrices de muestra.
8. En un paciente con recuento de plaquetas de 45 000 por microlitro informado por el analizador, el frotis muestra abundantes cúmulos plaquetarios. ¿Qué se debe hacer?
Los agregados plaquetarios dependientes de EDTA producen seudotrombocitopenia: el analizador no cuenta las plaquetas agregadas. La repetición en citrato suele resolverla, aplicando la corrección por la dilución que introduce ese tubo. Fuente: consensos del ICSH sobre recuento de plaquetas y seudotrombocitopenia.
9. ¿Qué anticoagulante se prefiere para la prueba de velocidad de sedimentación globular por el método clásico?
El método clásico de sedimentación emplea citrato de sodio en una proporción propia, distinta de la usada en coagulación. Existen variantes con EDTA y dilución, pero el método de referencia se define con citrato. Fuente: consensos del ICSH sobre medición de la velocidad de sedimentación.
10. ¿Cuál es la razón de mezclar el tubo por inversión suave y no agitarlo con fuerza?
La agitación enérgica rompe eritrocitos y libera potasio, lactato deshidrogenasa y hemoglobina libre, además de interferir ópticamente. La mezcla correcta es por inversión completa y suave el número de veces indicado por el fabricante del tubo. Fuente: consenso CLSI sobre manejo de muestras y guías del inserto del fabricante.
11. ¿Cuál es el estímulo fisiológico principal de la producción de eritropoyetina?
La eritropoyetina se produce mayoritariamente en el riñón en respuesta a la hipoxia tisular, mediada por factores inducibles por hipoxia. El hierro, las plaquetas y la bilirrubina no son el estímulo de su síntesis. Fuente: consensos del ICSH y textos de referencia de hematología de laboratorio.
12. ¿Qué caracteriza morfológicamente al eritrocito maduro frente a su precursor inmediato?
El precursor inmediato es el reticulocito, que ya carece de núcleo pero conserva ARN ribosómico precipitable con azul de cresilo brillante o azul de metileno nuevo; el eritrocito maduro ya no tiene ese ARN. Fuente: consensos del ICSH sobre recuento de reticulocitos.
13. ¿Qué información aporta la tinción supravital con azul de cresilo brillante que no da la tinción de Wright?
La tinción supravital actúa sobre células vivas y precipita material que la tinción de Romanowsky no revela: ARN reticulocitario y hemoglobina desnaturalizada de los cuerpos de Heinz. El hierro medular requiere azul de Prusia. Fuente: consensos del ICSH sobre reticulocitos y tinciones supravitales.
14. ¿Qué explica que la hemoglobina fetal tenga mayor afinidad por el oxígeno que la del adulto?
El dos tres difosfoglicerato estabiliza la forma desoxigenada uniéndose a la cavidad central; las cadenas gamma lo fijan con menos eficacia, de modo que la curva se desplaza a la izquierda. El contenido de hierro y la unión del hemo son iguales. Fuente: textos de referencia de hematología y consensos del ICSH sobre hemoglobinas.
15. ¿Cuál es el destino del hierro liberado por la destrucción fisiológica de los eritrocitos?
El sistema mononuclear fagocítico recupera el hierro del hemo y lo devuelve a la circulación unido a transferrina o lo almacena como ferritina; el organismo carece de una vía de excreción regulada del hierro. La bilirrubina, no el hierro, se conjuga y se excreta por la bilis. Fuente: textos de referencia de bioquímica clínica y consensos del ICSH.
16. Con un hematocrito de 36 % y un recuento de eritrocitos de 4,0 millones por microlitro, ¿cuál es el volumen corpuscular medio?
El volumen corpuscular medio es el hematocrito en por ciento multiplicado por diez y dividido entre el recuento en millones por microlitro: 36 por 10 entre 4,0 da 90 femtolitros. Los demás factores no corresponden a la definición del índice. Fuente: consensos del ICSH sobre índices eritrocitarios.
17. Con hemoglobina de 12,0 g/dL y recuento de eritrocitos de 4,0 millones por microlitro, ¿cuál es la hemoglobina corpuscular media?
La hemoglobina corpuscular media se obtiene multiplicando la hemoglobina en gramos por decilitro por diez y dividiendo entre el recuento en millones por microlitro: 120 entre 4,0 da 30 picogramos. La fórmula con hematocrito corresponde a otro índice. Fuente: consensos del ICSH sobre índices eritrocitarios.
18. Con hemoglobina de 9,0 g/dL y hematocrito de 27 %, ¿cuál es la concentración de hemoglobina corpuscular media?
La concentración de hemoglobina corpuscular media es la hemoglobina por cien dividida entre el hematocrito: 900 entre 27 da 33,3 gramos por decilitro. Es el único índice que no usa el recuento eritrocitario. Fuente: consensos del ICSH sobre índices eritrocitarios.
19. Un paciente presenta hematocrito de 27 % y recuento eritrocitario de 3,6 millones por microlitro. ¿Cuál es su volumen corpuscular medio?
Aplicando la fórmula del índice, 27 multiplicado por 10 y dividido entre 3,6 da 75 femtolitros. Los distractores emplean factores o divisores que no corresponden a la definición del volumen corpuscular medio. Fuente: consensos del ICSH sobre índices eritrocitarios.
20. Un analizador informa una concentración de hemoglobina corpuscular media de 41 g/dL. ¿Qué debe hacer el tecnólogo médico antes de validar?
Una concentración de hemoglobina corpuscular media notablemente por encima del límite de solubilidad de la hemoglobina señala artefacto: hemólisis in vitro que reduce el recuento y el hematocrito sin reducir la hemoglobina, lipemia que eleva la lectura fotométrica, o crioaglutininas que agrupan eritrocitos. Fuente: consenso CLSI sobre revisión de resultados y consensos del ICSH.
21. En una muestra con crioaglutininas potentes mantenida a temperatura ambiente, ¿qué patrón de resultados cabe esperar?
Los aglutinados se cuentan como una sola célula grande: el recuento baja, el volumen corpuscular medio sube y, como la hemoglobina no cambia, la concentración de hemoglobina corpuscular media resulta desproporcionadamente alta. Calentar la muestra a temperatura corporal antes de procesarla corrige el artefacto. Fuente: consensos del ICSH sobre interferencias del hemograma.
22. ¿Qué expresa la amplitud de distribución eritrocitaria informada por los analizadores?
Es un coeficiente de variación del volumen eritrocitario y traduce numéricamente lo que la morfología llama anisocitosis. No mide contenido de hemoglobina ni velocidad de tránsito. Fuente: consensos del ICSH sobre parámetros derivados del hemograma.
23. Con reticulocitos de 3,0 % y recuento eritrocitario de 2,5 millones por microlitro, ¿cuál es el recuento absoluto de reticulocitos?
El recuento absoluto es el porcentaje dividido entre cien multiplicado por el recuento eritrocitario: 0,03 por 2 500 000 da 75 000 por microlitro. El valor absoluto evita el sesgo del porcentaje cuando la masa eritrocitaria está reducida. Fuente: consensos del ICSH sobre recuento de reticulocitos.
24. Un paciente tiene reticulocitos de 6,0 % y hematocrito de 21 %. Usando 45 % como hematocrito de referencia del cálculo, ¿cuál es el porcentaje corregido?
La corrección por anemia multiplica el porcentaje observado por el cociente entre el hematocrito del paciente y el hematocrito de referencia utilizado: 6,0 por 21 entre 45 da 2,8 %. El valor de referencia empleado se declara siempre en el procedimiento del laboratorio. Fuente: consensos del ICSH sobre corrección del recuento de reticulocitos.
25. Con un porcentaje de reticulocitos corregido de 2,8 % y un factor de maduración de 2,0 aplicable a ese grado de anemia, ¿cuál es el índice de producción reticulocitaria?
El índice de producción divide el porcentaje ya corregido entre el factor de maduración correspondiente al grado de anemia, que refleja la salida precoz de reticulocitos a la sangre: 2,8 entre 2,0 da 1,4. Fuente: consensos del ICSH sobre índices reticulocitarios.
26. ¿Por qué el porcentaje de reticulocitos puede inducir a error en un paciente muy anémico?
Un mismo número absoluto de reticulocitos sobre menos eritrocitos totales da un porcentaje mayor sin que la médula produzca más; por eso se informa el valor absoluto o el porcentaje corregido. Fuente: consensos del ICSH sobre recuento e interpretación de reticulocitos.
27. El analizador informa 20,0 x 10^3 leucocitos por microlitro y el frotis muestra 25 eritroblastos por 100 leucocitos. ¿Cuál es el recuento corregido?
El contador incluye los eritroblastos entre los leucocitos porque no lisan igual; la corrección multiplica el recuento por cien y divide entre cien más el número de eritroblastos por cien leucocitos: 20,0 por 100 entre 125 da 16,0. Fuente: consensos del ICSH sobre corrección del recuento leucocitario.
28. Con un recuento de 15,6 x 10^3 leucocitos por microlitro y 30 eritroblastos por 100 leucocitos, ¿cuál es el recuento leucocitario corregido?
Aplicando la fórmula, 15,6 multiplicado por 100 y dividido entre 130 da 12,0 x 10^3 por microlitro. El umbral a partir del cual se corrige lo fija el procedimiento del laboratorio, no una regla universal. Fuente: consensos del ICSH sobre corrección del recuento leucocitario.
29. Con leucocitos de 8,0 x 10^3 por microlitro y un diferencial de 60 % de segmentados y 5 % de cayados, ¿cuál es el recuento absoluto de neutrófilos?
El recuento absoluto de neutrófilos incluye segmentados y cayados: 65 % de 8 000 da 5 200 por microlitro. Informar valores absolutos evita la lectura errónea de los porcentajes cuando el total está alterado. Fuente: consensos del ICSH sobre el recuento diferencial.
30. ¿Por qué se informan recuentos absolutos además de porcentajes en el diferencial leucocitario?
El porcentaje es una proporción y depende del denominador; una linfocitosis relativa con leucocitos bajos puede corresponder a un número absoluto normal. Por eso el valor absoluto es el que se interpreta. Fuente: consensos del ICSH sobre presentación del diferencial.
31. ¿Cuál es la zona del frotis de sangre periférica adecuada para el examen morfológico?
La zona de lectura es la del frotis donde los eritrocitos apenas se rozan; en la parte gruesa se superponen y se ven falsamente esferocíticos, y en la cola se acumulan células grandes y se deforman los leucocitos. Fuente: consensos del ICSH sobre preparación y examen del frotis.
32. Un frotis muestra numerosos eritrocitos crenados con espículas cortas y regulares y ausencia de otros hallazgos. ¿Qué debe sospecharse primero?
La equinocitosis con espículas cortas, regulares y distribuidas por toda la célula es habitualmente un artefacto de preparación o de anticoagulante; los hallazgos patológicos suelen acompañarse de otros cambios morfológicos. Fuente: consensos del ICSH sobre artefactos del frotis.
33. ¿Qué distingue el rouleaux de la aglutinación eritrocitaria verdadera en el frotis?
El rouleaux se debe a proteínas plasmáticas que reducen la repulsión entre membranas y forma apilamientos regulares que se deshacen al reemplazar el plasma por salina; la aglutinación por anticuerpos forma cúmulos irregulares que persisten. Fuente: consensos del ICSH sobre morfología eritrocitaria.
34. ¿Qué indica la presencia de policromatofilia en un frotis teñido con Wright?
La policromatofilia corresponde a reticulocitos vistos con tinción de Romanowsky: el ARN residual da tono azulado. Las inclusiones de hemoglobina desnaturalizada requieren tinción supravital y los restos nucleares tienen otra morfología. Fuente: consensos del ICSH sobre nomenclatura morfológica.
35. ¿Qué diferencia hay entre un cuerpo de Howell-Jolly y un punteado basófilo?
El cuerpo de Howell-Jolly es un fragmento nuclear único, redondo y bien delimitado; el punteado basófilo es una granulación fina y difusa de ribosomas agregados. Ambos se ven con tinción de Romanowsky. Fuente: consensos del ICSH sobre nomenclatura de inclusiones eritrocitarias.